Zoonotic smooth and rough Brucella in dogs: seroprevalence and associated factors in an Atlantic Rainforest area of the state of Paraíba, Northeastern Brazil / Brucella zoonóticalisa e rugosa em cães: soroprevalência e fatores associados em área de Mata Atlântica do estado da Paraíba, Nordeste brasileiro

ABSTRACT: Canine brucellosisis an infectious disease caused by bacteria of the genus Brucella, with world wide distribution and zoonotic impact, and in humans and animals is a neglected disease. In the present study, the sero prevalence of B. canis and B. abortus were determined in a probabilistic sample of housed dogs from the Atlantic Rainforest area of the state of Paraíba, Brazil, and the factors associated with sero positivity. A total of 386 dogs over three months of age were used. For the search for anti-B.canis antibodies the agar gel immune diffusion test (IDGA) was used as a screening and IDGA+2ME as confirmatory test, and to search for anti-B. abortus antibodies the Rose Bengal test (RBT) test was used. Apparent and real prevalences were calculated, and robust Poisson regression was used to identify factors associated with prevalence. The real prevalence fB. Canis was 12.6% and of B. abortus was 22.8%. The factors associated with sero positivity for B. canis were age greater than 10 years (prevalence ratio; PR = 6.38; P = 0.024) and dogs reared in they ard (PR = 5.20; P = 0.035) and for B. abortus was no treplacement of water of animals everyday (PR = 1.48; P = 0.033). It can be concluded that the prevalence of B. canis and B. Abortus in the region is high, which warns to the adopting of control and prevention measures, as well as greater care in the management of animals, especially for elderly dogs.

RESUMO: A brucelose canina é uma doença infecciosa causada por bactérias do gênero Brucella, com distribuição mundial e de caráter zoonótico, e em humanos e animais é uma doença negligenciada. No presente estudo foram determinados as soroprevalências de B. canis e B. abortusem uma amostra probabilística de cães domiciliados da área urbana de oito municípios localizados na região da Mata Atlântica do Estado da Paraíba, Brasil, e os fatores associados com a soropositividade. Foram utilizados 386 cães com mais de três meses de idade. Para a pesquisa de anticorpos anti-B. canis foi utilizado o teste de imunodifusão em gel de ágar (IDGA) como triagem e IDGA+2ME como confirmatório, e para a pesquisa de anticorpos anti-B. abortusfoi utilizado o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT). Foram calculadas as prevalências aparente e real, e para a identificação de fatores associados com a prevalência foi empregada regressão robusta de Poisson. A prevalência real de B. canis foi de 12,6% e de B. abortusfoi 22,8%. Os fatores associados com a soropositividade para B. canis foram idade maior que 10 anos (razão de prevalência; RP = 6,38; P = 0,024) e cães criados presos no quintal (RP = 5,20; P = 0,035) e para B. abortus foi não trocar a água dos animais todos os dias (RP = 1,48; P = 0,033). Conclui-se que a prevalência de B. canis e B. abortusem cães da região é alta, o que alerta para a necessidade de adoção de medidas de controle e prevenção, bem como são sugeridos maiores cuidados no manejo dos animais, sobretudo cães idosos.

High proportion of cattle and sheep seropositive and renal carriers of Leptospira sp. under semiarid conditions / Alta proporção de bovinos e ovinos soropositivos e portadores renais de Leptospira sp. em condições semiáridas

The aims of this study were to perform serological and molecular detection of Leptospira sp. infection in cattle and sheep under semiarid conditions. Based on a preliminary study performed in our research group, we selected six rural properties showing a positivity ≥ 60% for Sejroe serogroup with titer ≥ 200 measured in serological tests from cattle. In the present study, blood and urine samples were collected from 99 females of reproductive age (51 cattle and 48 sheep) for serological diagnosis, molecular detection and Leptospira sp. attempt to strain recovery. Of the 99 analyzed animals 38.4% (38/99) were positively reactive at the serological tests. Of them, 49% (25/51) were cattle and 27.1% (13/48) sheep. The serogroups detected in cattle were Sejroe (36.8%), Hebdomadis (26.3%), Australis (10.5%), Djasiman (10.5%), Ballum (5.3%), Pomona (5.3%), and Cynopteri (5.3%) with titers of 100–800. In sheep, the reactive serogroups were Australis (27.3%), Ballum (27.3%), Djasiman (18.1%), Tarassovi (9.1%), Icterohaemorrhagiae (9.1%), and Cynopteri (9.1%) with titers of 100–400. Leptospiral DNA was detected in nine urine samples, including five cattle and four sheep. Property 1 showed the highest serological positivity frequencies for both cattle (70.6%) and sheep (70.6%). Similarly, the highest frequency of DNA detection was also found (eight samples, 89%). In this property, we observed the existence of consorted rearing of cattle and sheep with close coexistence between these species. In semiarid conditions, transmission among animals of the same species seems to be the main form of Leptospira sp. dissemination in cattle and sheep herds. However, the contribution of other domestic and wild animals cannot be discarded. The practice of consorted rearing of cattle and sheep and their close coexistence may facilitate the spread of the pathogen in rural properties.

Os objetivos deste estudo foram realizar detecção sorológica e molecular da infecção por Leptospira sp. em bovinos e ovinos em condições semiáridas. Com base em estudo preliminar realizado em nosso grupo de pesquisa, foram selecionadas seis propriedades rurais com soropositividade ≥ 60% para o sorogrupo Sejroe com título ≥ 200 em bovinos. No presente estudo, amostras de sangue e urina foram coletadas de 99 fêmeas em idade reprodutiva (51 bovinos e 48 ovinos) para diagnóstico sorológico, detecção molecular e tentativa de recuperação de estirpesde Leptospira sp. Dos 99 animais analisados, 38,4% (38/99) foram sororeativos nos testes sorológicos. Destes, 49% (25/51) eram bovinos e 27,1% (13/48) ovinos. Os sorogrupos detectados em bovinos foram Sejroe (36,8%), Hebdomadis (26,3%), Australis (10,5%), Djasiman (10,5%), Ballum (5,3%), Pomona (5,3%) e Cynopteri (5,3%) com títulos de 100 a 800. Nos ovinos, os sorogrupos reativos foram Australis (27,3%), Ballum (27,3%), Djasiman (18,1%), Tarassovi (9,1%), Icterohaemorrhagiae (9,1%) e Cynopteri (9,1%) com títulos de 100-400. O DNA leptospiral foi detectado em nove amostras de urina, incluindo cinco bovinos e quatro ovinos. A propriedade 1 apresentou as maiores frequências de positividade sorológica para bovinos (70,6%) e ovinos (70,6%). Da mesma forma, a maior frequência de detecção de DNA também foi encontrada (oito amostras, 89%). Nesta propriedade observou-se a existência de criação consorciada de bovinos e ovinos com estreita convivência entre estas espécies. Em condições semiáridas, a transmissão entre animais da mesma espécie parece ser a principal forma de disseminação de Leptospira sp. em rebanhos bovinos e ovinos. No entanto, a contribuição de outros animais domésticos e selvagens não pode ser descartada. A prática de criação consorciada de bovinos e ovinos e sua estreita convivência podem facilitar a disseminação do patógeno em propriedades rurais.

High proportion of cattle and sheep seropositive and renal carriers of Leptospira sp. under semiarid conditions / Alta proporção de bovinos e ovinos soropositivos e portadores renais de Leptospira sp. em condições semiáridas

The aims of this study were to perform serological and molecular detection of Leptospira sp. infection in cattle and sheep under semiarid conditions. Based on a preliminary study performed in our research group, we selected six rural properties showing a positivity ≥ 60% for Sejroe serogroup with titer ≥ 200 measured in serological tests from cattle. In the present study, blood and urine samples were collected from 99 females of reproductive age (51 cattle and 48 sheep) for serological diagnosis, molecular detection and Leptospira sp. attempt to strain recovery. Of the 99 analyzed animals 38.4% (38/99) were positively reactive at the serological tests. Of them, 49% (25/51) were cattle and 27.1% (13/48) sheep. The serogroups detected in cattle were Sejroe (36.8%), Hebdomadis (26.3%), Australis (10.5%), Djasiman (10.5%), Ballum (5.3%), Pomona (5.3%), and Cynopteri (5.3%) with titers of 100­800. In sheep, the reactive serogroups were Australis (27.3%), Ballum (27.3%), Djasiman (18.1%), Tarassovi (9.1%), Icterohaemorrhagiae (9.1%), and Cynopteri (9.1%) with titers of 100­400.Leptospiral DNA was detected in nine urine samples, including five cattle and four sheep. Property 1 showed the highest serological positivity frequencies for both cattle (70.6%) and sheep (70.6%). Similarly, the highest frequency of DNA detection was also found (eight samples, 89%). In this property, we observed the existence of consorted rearing of cattle and sheep with close coexistence between these species. In semiarid conditions, transmission among animals of the same species seems to be the main form of Leptospira sp. dissemination in cattle and sheep herds. However, the contribution of other domestic and wild animals cannot be discarded. The practice of consorted rearing of cattle and sheep and their close coexistence may facilitate the spread of the pathogen in rural properties.

Os objetivos deste estudo foram realizar detecção sorológica e molecular da infecção por Leptospira sp. em bovinos e ovinos em condições semiáridas. Com base em estudo preliminar realizado em nosso grupo de pesquisa, foram selecionadas seis propriedades rurais com soropositividade ≥ 60% para o sorogrupo Sejroe com título ≥ 200 em bovinos. No presente estudo, amostras de sangue e urina foram coletadas de 99 fêmeas em idade reprodutiva (51 bovinos e 48 ovinos) para diagnóstico sorológico, detecção molecular e tentativa de recuperação de estirpesde Leptospira sp. Dos 99 animais analisados, 38,4% (38/99) foram sororeativos nos testes sorológicos. Destes, 49% (25/51) eram bovinos e 27,1% (13/48) ovinos. Os sorogrupos detectados em bovinos foram Sejroe (36,8%), Hebdomadis (26,3%), Australis (10,5%), Djasiman (10,5%), Ballum (5,3%), Pomona (5,3%) e Cynopteri (5,3%) com títulos de 100 a 800. Nos ovinos, os sorogrupos reativos foram Australis (27,3%), Ballum (27,3%), Djasiman (18,1%), Tarassovi (9,1%), Icterohaemorrhagiae (9,1%) e Cynopteri (9,1%) com títulos de 100-400. O DNA leptospiral foi detectado em nove amostras de urina, incluindo cinco bovinos e quatro ovinos. A propriedade 1 apresentou as maiores frequências de positividade sorológica para bovinos (70,6%) e ovinos (70,6%). Da mesma forma, a maior frequência de detecção de DNA também foi encontrada (oito amostras, 89%). Nesta propriedade observou-se a existência de criação consorciada de bovinos e ovinos com estreita convivência entre estas espécies. Em condições semiáridas, a transmissão entre animais da mesma espécie parece ser a principal forma de disseminação de Leptospira sp. em rebanhos bovinos e ovinos. No entanto, a contribuição de outros animais domésticos e selvagens não pode ser descartada. A prática de criação consorciada de bovinos e ovinos e sua estreita convivência podem facilitar a disseminação do patógeno em propriedades rurais.

Leptospira interrogans infection in tegu lizard (Tupinambis merianae), Brazil / Infecção por Leptospira interrogans em lagarto teiú (Tupinambis merianae), Brasil

ABSTRACT: We used 12 tegu lizards (Tupinambis merianae) from northeastern Brazil, and we reported nine (75%) Leptospira sp. PCR-positive animals and six (50%) seropositive. Leptospira sp. DNA sequencing revealed 99% similarity with L. interrogans. Our findings indicated that this species may play a role in the transmission of human leptospirosis.

RESUMO: Foram utilizados 12 lagartos Teiús (Tupinambis merianae) do Nordeste do Brasil. Encontramos nove animais positivos (75%) para Leptospira sp. na PCR e seis (50%) soropositivos. O sequenciamento de DNA de Leptospira sp. revelou 99% de semelhança com L. interrogans. Os resultados indicam que esta espécie pode desempenhar um papel importante na transmissão da leptospirose humana.

Epidemiological characterization of leptospirosis in horses in the state of Pernambuco, northeastern Brazil / Caracterização epidemiológica da leptospirose em equinos do estado de Pernambuco, nordeste do Brasil

An epidemiological survey aiming to determine the occurrence of anti-Leptospira antibodies and to identify risk factors was carried out in horses of the Pajeú microregion, state of Pernambuco. Sera from 100 horses from 38 properties in four counties in the region were examined by the microscopic agglutination test (MAT), using 24 Leptospira spp. serovars as antigens. Of the 100 samples tested, 28 (28%) were positive. Most prevalent serovars were Patoc (35.71%), Butembo (32.14%) and Sentot (14.30%). Supply of pasture as forage (odds ratio =7.80; 95% confidence interval - 95%CI 1.71-35.50; p=0.008) was identify as risk factor. It is suggested the need for studies on agent isolation and characterization of its pathogenicity, as well as it is recommended the rodent control in deposits of feed and environment.(AU)

Foi realizado um inquérito epidemiológico objetivando determinar a ocorrência de anticorpos anti-Leptospira e elencar os fatores de risco em equinos da microrregião do Pajeú, estado de Pernambuco. Foram examinados 100 soros de equinos provenientes de 38 propriedades de 4 municípios da região, pela prova de soroaglutinação microscópica (SAM), utilizando 24 sorovares de Leptospira spp. como antígeno. Das 100 amostras testadas, 28 (28%) foram reagentes. Os sorovares mais frequentes foram Patoc (35,71%), Butembo (32,14%) e Sentot (14,30%). O uso de pasto como volumoso (odds ratio =7,80; intervalo de confiança de 95% - IC95% 1,71-35,50; p=0,008) foi identificado como fator de risco. Sugere-se a necessidade de estudos acerca do isolamento do agente e da caracterização de sua patogenicidade, bem como se recomenda o controle de roedores em depósitos de ração e no ambiente.(AU)

Leptospirose em pequenos ruminantes: situação epidemiológica atual no Brasil / Leptospirosis in small ruminants: current epidemiological situation in Brazil

A leptospirose em pequenos ruminantes é uma doença que pode causar perdas econômicas devido à ocorrência de abortamentos, natimortalidade e diminuição da produção de leite. A infecção pode se apresentar nas formas aguda, crônica e inaparente. Na forma aguda, pode ocorrer anorexia, depressão, dificuldade respiratória, febre, hemoglobinemia e hemoglobinúria. Na forma crônica, abortamentos e natimortalidade são comuns. Vários inquéritos sorológicos recentes conduzidos no Brasil apontaram frequências de soropositividade variando de 3,4 a 31,3% em caprinos, e de 0,7 a 34,6% em ovinos. Os sorovares reatores mais frequentes foram Autumnalis, Grippotyphosa, Hardjo, Icterohaemorrhagiae e Pyrogenes. O teste de soroaglutinação microscópica é o método mais empregado para o diagnóstico da infecção. O controle da leptospirose em pequenos ruminantes é baseado na identificação de fontes de infecção, controle de roedores, controle da aquisição de animais e imunização sistemática com vacinas inativadas que contenham sorovares de leptospiras regionais.(AU)

Leptospirosis in small ruminants is a disease that can lead to economic losses due to the occurrence of abortions, stillbirths and decreased milk production. The infection can be presented in acute, chronic and inapparent forms. In the acute infection, anorexia, depression, difficulty breathing, fever, hemoglobinemia and hemoglobinuria can occur. In the chronic form, abortions and stillbirths are common. Several recent serological surveys conducted in Brazil revealed frequencies of seropositivity ranging from 3.4 to 31.3% in goats, and from 0.7 to 34.6% in sheep. Most frequent reactions were obtained with the serovars Autumnalis, Grippotyphosa, Hardjo, Icterohaemorrhagiae and Pyrogenes. The microscopic agglutination test is the most used method to diagnose the infection. The control of leptospirosis in small ruminants is based on the identification of sources of infection, rodent control, control in animal purchasing and systematic immunization with inactivated vaccines that contain regional serovars of leptospires.(AU)

Seroepidemiology of bovine leptospirosis and brucellosis in family farm rural properties in the State of Paraiba, northeastern Brazil / Soroepidemiologia da leptospirose e brucelose bovina em propriedades rurais de agricultura familiar do agreste paraibano, Nordeste do Brasil

The aim of this investigation was to determine the frequency of positive herds and seropositive animals to bovine leptospirosis and brucellosis in family farm rural properties from the mesoregion of the State of Paraíba, as well as to identify risk factors. Blood samples were collected from 771 animals from 130 herds in five municipalities. For the serological diagnosis of leptospirosis, the microscopic agglutination test (MAT) using 24 Leptospira spp. serovars as antigens was carried out, and for brucellosis the Rose-Bengal Test (RBT) was used as screening test and the 2-mercaptoethanol test (2-ME) to confirm. For leptospirosis, the frequency of positive herds and seropositive animals was 18.4 and 3.6%, respectively; for brucellosis, 7.7% of the herds and 1.9% of the animals were positive. The most frequent Leptospira spp. serovar was Hardjo. Bovine purchase was identified as a risk factor to bovine brucellosis (odds ratio = 5.25; p = 0.044). The need for adoption and/or intensification of control and prevention measures was suggested in order to avoid economic losses and the transmission of the agents to humans, as well as the purchase of animals with known sanitary conditions.

Este trabalho teve como objetivo determinar a frequência de rebanhos positivos e de animais soropositivos para leptospirose e brucelose bovina em propriedades rurais de agricultura familiar da mesorregião do Agreste, estado da Paraíba, bem como identificar fatores de risco. Foram colhidas amostras de sangue de 771 animais procedentes de 130 rebanhos em cinco municípios. Para o diagnóstico sorológico da leptospirose, utilizou-se o teste de soroaglutinação microscópica (SAM), com 24 sorovares de Leptospira spp. como antígenos, e para brucelose, o teste do antígeno acidificado tamponado (AAT) como prova de triagem e o teste do 2-mercaptoetanol (2-ME) como prova confirmatória. Para leptospirose, a frequência de propriedades positivas e animais soropositivos foi de 18,4 e 3,6%, respectivamente; para brucelose, 7,7% das propriedades e 1,9% dos animais foram positivos. O sorovar de Leptospira spp. mais frequente foi o Hardjo. A compra de bovinos foi identificada como fator de risco para brucelose bovina (odds ratio = 5,25; p = 0,044). Sugere-se a necessidade de adoção e/ou intensificação de medicas de prevenção e controle com o objetivo de evitar perdas econômicas e transmissão dos agentes aos seres humanos, bem como a compra de animais precedida do conhecimento da sua condição sanitária.

Soroepidemiologia da leptospirose canina na região metropolitana de Natal, estado do Rio Grande do Norte / Seroepidemiology of canine leptospirosis in the metropolitan area of Natal, Rio Grande do Norte State

Objetivou-se com este estudo determinar a frequência de cães soropositivos para anticorpos anti-Leptospira spp. no município de Natal e região metropolitana, estado do Rio Grande do Norte, e identificar fatores de risco associados à infecção. Foram examinadas 365 amostras de soro sanguíneo de cães atendidos na rotina de diversas clínicas veteri- nárias durante o período de março a novembro de 2011. O diagnóstico sorológico da leptospirose foi realizado pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM), utilizando-se 24 sorovares de Leptospira spp. como antígenos. Dos 365 cães, 25 foram soropositivos para pelo menos um dos sorovares de Leptospira spp., com frequência de 6,8%. Os sorovares com reações sorológicas mais frequentes foram Shermani (40%), Sentot (36%) e Copenhageni (20%). O perfil epidemiológico da leptospirose canina na região metropolitana de Natal, estado do Rio Grande do Norte, indica que a infecção ocorre com frequência baixa em comparação com outras regiões, provavelmente devido ao grande percentual de animais vacinados, bem como, sugere-se distribuição homogênea de animais soropositivos na região. Por outro lado, a presença de roedores pode ser um importante fator de risco, uma vez que sorovares mantidos por estes animais foram identificados entre os mais frequentes.

The aim of this study was to determine the frequency of dogs seropositive to anti-Leptospira spp. antibodies in Natal and metropolitan area, Rio Grande do Norte state, and to identify risk factors associated with the infection. A total of 365 blood samples were collected from dogs attended at the routine of several veterinary clinics during March to November 2011. Serological diagnosis of leptospirosis was carried out using the microscopic agglutination test (MAT) with 24 Leptospira spp. serovars as antigens. Of the 365 dogs 25 were seropositive for at least one of the Leptospira spp. serovars with frequency of 6.8%. Serovars with most frequent serological reactions were Shermani (40%), Sentot (36%) and Copenhageni (20%). The epidemiological profile of canine leptospirosis in the metropolitan region of Natal, Rio Grande do Norte state, indicates that the infection occurs in a low frequency compared with other regions, probably due to high percentage of vaccinated animals, as well as it is suggested homogenous distribution of seropositive animals in the region. Moreover, presence of rodents can be a significant risk factor since serovars maintained by these animals were identified among the most frequent.

Risk factors associated with Toxoplasma gondii seroprevalence in goats in the State of Paraíba, Brazil / Fatores de risco associados à soroprevalência de Toxoplasma gondii em caprinos do Estado da Paraíba, Brasil

A cross-sectional study based on planned sampling was carried out to determine flock-level risk factors associated with Toxoplasma gondii antibody prevalence in dairy goat flocks in a semiarid region of northeastern Brazil. Serum samples from 975 adult dairy goats from 110 flocks were examined by indirect immonufluorescent antibody test (IFAT), using cut-off point at 1:64 dilution. From the 110 flocks, 77 presented at least one seropositive animal, corresponding to a prevalence of 70% (95% CI: 60.5-78.4%). Out of the 975 animals, 177 (18.1%; 95% CI = 15.8-20.7%) tested positive. The presence of toxic plants (OR = 5.11; P = 0.045) and the fact that goat breeding is not the main activity on the farm (OR = 3.34; P = 0.014) were identified as risk factors. The results of the present study showed evidence of the presence of T. gondii infection in dairy goats from a semiarid region of northeastern Brazil using planned sampling. Further studies are needed to elucidate the importance of the identified risk factors in the epidemiology of the infection.(AU)

Foi conduzido um estudo transversal baseado em amostragem planejada com o objetivo de determinar fatores de risco associados com a prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondii, em rebanhos de caprinos leiteiros, em uma região semiárida do Nordeste do Brasil. Amostras de soro de 975 caprinos leiteiros adultos, procedentes de 110 propriedades, foram examinadas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se como ponto de corte a diluição 1:64. Das 110 propriedades, 77 apresentaram pelo menos um animal soropositivo, correspondendo a uma prevalência de 70% (IC 95%: 60,5-78,4%). Dos 975 animais, 177 (18,1%; IC 95% = 15,8-20,7%) foram positivos. Apesar da presença de plantas tóxicas (OR = 5,11; P = 0,045) e da caprinocultura não ser a principal atividade na propriedade (OR = 3,34; P = 0,014), foram identificados como fatores de risco. Os resultados do presente estudo mostraram uma evidência da presença da infecção por T. gondii, em caprinos leiteiros, em uma região semiárida do Nordeste do Brasil, utilizando-se uma amostragem planejada. Há necessidade de condução de estudos posteriores para elucidar a importância epidemiológica dos fatores de risco identificados.(AU)

Mycobacterium bovis infection in goats from the Northeast region of Brazil

A total of 8,058 male and female mixed-breed goats and 1-4 years of age were slaughtered over a period of 7 months at the public slaughterhouse of Patos city, Paraíba state, in the Northeast region of Brazil; 822 animals were inspected for gross lesions of tuberculosis, and 12 (1.46 percent) had lesions suggestive of tuberculosis in the mammary gland, lungs, liver and mediastinal, mesenteric, submandibular, parotid and prescapular lymph nodes. Presence of granulomatous lesions was confirmed in the submandibular lymph node of one (8.3 percent) goat at the histopathological examination and at the mycobacterium culture the same sample was confirmed positive. Isolate was confirmed as belonging to the M. tuberculosis complex by PCR restriction enzyme analysis (PRA). Spoligotyping identified the isolate into spoligotype SB0295 on the M. bovis Spoligotype Database website (www.mbovis.org), and it was classified as M. bovis. The occurrence of M. bovis in goats in this study suggests that this species may be a potential source of infection for humans and should be regarded as a possible problem in the advancement of control and eradication program for bovine tuberculosis in Brazil.